1.驗(yàn)證法規(guī)

新版GMP附錄1 無菌藥品：

第四十一條過濾器應(yīng)當(dāng)盡可能不脫落纖維。嚴(yán)禁使用含石棉的過濾器。過濾器不得因與產(chǎn)品發(fā)生反應(yīng)、釋放物質(zhì)或吸附作用而對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成不利影響。

第七十五條非zui終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當(dāng)符合以下要求：

（四）過濾除菌工藝應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，驗(yàn)證中應(yīng)當(dāng)確定過濾一定量藥液所需時(shí)間及過濾器二側(cè)的壓力。任何明顯偏離正常時(shí)間或壓力的情況應(yīng)當(dāng)有記錄并進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查結(jié)果應(yīng)當(dāng)歸入批記錄。

（五）同一規(guī)格和型號(hào)的除菌過濾器使用時(shí)限應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，一般不得超過一個(gè)工作日。

2.驗(yàn)證內(nèi)容

從法律的規(guī)定看，需要驗(yàn)證的內(nèi)容如下：

1）zui終滅菌制劑

需要驗(yàn)證：兼容性，溶出物，吸附性，選做“物料的完整性數(shù)據(jù)生成”。

需要確認(rèn)：無纖維脫落、潔凈度、生物安全性。

2）非zui終滅菌制劑

需要驗(yàn)證：兼容性，溶出物，吸附性，細(xì)菌生存性，細(xì)菌挑戰(zhàn)，選做“物料的完整性數(shù)據(jù)生成”。

需要確認(rèn)：無纖維脫落、潔凈度、生物安全性。

3.驗(yàn)證方法

3.1 兼容性分析

先將濾膜或?yàn)V芯浸泡在藥液中，在達(dá)到總計(jì)接觸時(shí)間之后，檢測(cè)濾膜或?yàn)V芯浸泡前后的變化，檢測(cè)指標(biāo)有：濾膜的完整性，水流速，重量，膜厚、濾芯的強(qiáng)度、外觀變化等物理參數(shù)。當(dāng)變化率小于規(guī)定的指標(biāo)時(shí)（目前尚無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，一般由濾芯廠家根據(jù)大量驗(yàn)證結(jié)果確定），確認(rèn)濾膜或?yàn)V芯的與藥液的兼容性。

3.2 溶出物分析

溶出物——Extractables，是指可以通過人工或超常規(guī)的力量（如溶劑、溫度、或時(shí)間）去除的一種化學(xué)物質(zhì)。

析出物——Leachables，是指在儲(chǔ)存或正常使用條件下，可以從接觸表面遷移進(jìn)入藥品或工藝流體的一種化學(xué)組分。

一般認(rèn)為析出物是溶出物的子集。

溶出物的分析方法有：NVR法、TOC法、RP-HPLC法等。

溶出物驗(yàn)證的目的是證明濾芯在藥液中的溶出物屬于濾芯固有的物質(zhì)，排除濾芯遭受外源污染的可能性，并且證明這種溶出物是安全的。

濾芯的溶出物驗(yàn)證需要濾芯本身通過如下驗(yàn)證：

1）濾芯本身材質(zhì)符合食品接觸級(jí)塑料要求或飲用水設(shè)備衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

2）濾芯通過生物安全性測(cè)試（USP<88>或中國(guó)藥典二部規(guī)定的異常毒性測(cè)試）。

3.3 吸附驗(yàn)證

當(dāng)藥液的成分對(duì)其藥效非常重要，而濾芯可能產(chǎn)生很強(qiáng)的吸附時(shí)需要做吸附驗(yàn)證。一般由濾芯使用者自行完成。

部分過濾器對(duì)產(chǎn)品的吸附作用極小，或產(chǎn)品吸附對(duì)產(chǎn)品活性成分影響極小時(shí)，吸附評(píng)估僅需要產(chǎn)品與濾芯小規(guī)模接觸后，得到影響極小的結(jié)論，并不需要作出吸附曲線。

若經(jīng)評(píng)估濾芯的吸附對(duì)產(chǎn)品影響很大，則需要建立預(yù)吸附飽和方案。

3.4 細(xì)菌生存性

細(xì)菌生存性試驗(yàn)是細(xì)菌挑戰(zhàn)的前提，其目的是尋找細(xì)菌挑戰(zhàn)可能的驗(yàn)證方案。根據(jù)生存性結(jié)果的不同，將料液和工藝定性為殺菌、中度殺菌、或非殺菌。與料液接觸工藝時(shí)間后，細(xì)菌logTr <1（死亡率<90％）的產(chǎn)品屬于非殺菌性產(chǎn)品；與料液接觸60min內(nèi)，細(xì)菌logTr >1 （死亡率>90%）的產(chǎn)品屬于殺菌性產(chǎn)品；與料液接觸60min內(nèi)，細(xì)菌logTr <1（死亡率<90％），同時(shí)與料液接觸工藝時(shí)間后，細(xì)菌logTr >1（死亡率>90%）的產(chǎn)品屬于中度殺菌產(chǎn)品。

3.5 細(xì)菌挑戰(zhàn)

細(xì)菌挑戰(zhàn)適用于除菌過濾工藝驗(yàn)證。

除菌級(jí)過濾器是指能夠?yàn)V除所有微生物，下游得到無菌無菌濾出液的過濾器。

除菌過濾工藝的物理檢測(cè)手段是濾芯的完整性檢測(cè)，生物指示劑為B. dimininuta，ATCC 19146，挑戰(zhàn)水平不低于10⁷CFU/cm2。

根據(jù)生存性結(jié)果，殺菌性產(chǎn)品和非殺菌性產(chǎn)品的挑戰(zhàn)方式不同，非殺菌性產(chǎn)品直接接種細(xì)菌后挑戰(zhàn)，殺菌性產(chǎn)品需要在產(chǎn)品循環(huán)后沖洗，再清除產(chǎn)品殘留后再用替代液挑戰(zhàn)。

3.6 物料完整性數(shù)據(jù)生成

物料完整性數(shù)據(jù)生成不屬于法律強(qiáng)制要求驗(yàn)證的內(nèi)容，其驗(yàn)證目的是使用產(chǎn)品代替水作為潤(rùn)濕液，從而簡(jiǎn)化完整性測(cè)試的程序。該驗(yàn)證非常適合滅菌后濾芯的完整性檢測(cè)和不能與水接觸物料的完整性檢測(cè)，但產(chǎn)品完整性數(shù)據(jù)生成的前提是產(chǎn)品是穩(wěn)定的，揮發(fā)性適當(dāng)?shù)娜芤?，懸濁液、?qiáng)揮發(fā)性溶液等無法進(jìn)行相關(guān)驗(yàn)證。產(chǎn)品完整性數(shù)據(jù)生成的結(jié)果必須得到細(xì)菌挑戰(zhàn)的驗(yàn)證。